ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研實(shí)驗(yàn)中得到了廣泛應(yīng)用，然而科研新手們面對(duì)各種各樣、動(dòng)則上千種的ELISA試劑盒，內(nèi)心應(yīng)該是崩潰的。各種廠家、品牌，各種種屬，各種參數(shù)，琳瑯滿目，質(zhì)量良莠不齊，如何浪里淘金，選擇既符合研究需求，又品質(zhì)上乘的 ELISA 試劑盒呢?今天教教大家如何正確找到合適的ELISA試劑盒。
1.要明確樣本類型
不同廠家驗(yàn)證樣本類型不同，即使同一廠家不同試劑盒，其驗(yàn)證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本，根據(jù)樣本處理方式的差異，分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿，因此購(gòu)買(mǎi)前需仔細(xì)核對(duì)。
2.要會(huì)預(yù)測(cè)自己的目標(biāo)因子的濃度
一般來(lái)說(shuō)，待測(cè)因子可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或資料獲得參考的檢測(cè)范圍，且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門(mén)炎癥因子 IL-6，正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL，病人會(huì)顯著增高，CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。因而，必要時(shí)進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測(cè)范圍的試劑盒極其重要。若濃度太低，可選擇高敏試劑盒;若不確定待測(cè)濃度或樣本間濃度差異較大，建議使用檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍更寬的化學(xué)發(fā)光法ELISA試劑盒。如同樣為 IL-6 ELISA 試劑盒，各類型檢測(cè)范圍差異較大，需要根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。
3.檢查試劑盒進(jìn)行過(guò)哪些質(zhì)控
質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)在說(shuō)明書(shū)中即可找到，在購(gòu)買(mǎi)前檢查試劑盒是否進(jìn)行過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控實(shí)驗(yàn)，包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實(shí)驗(yàn)、線性稀釋實(shí)驗(yàn)及交叉反應(yīng)測(cè)試等，每個(gè)數(shù)據(jù)好都看一下，確保的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。
4.確定需檢測(cè)的因子數(shù)量
如果待測(cè)因子超過(guò) 5 個(gè)，且樣本量較小時(shí)，單因子 ELISA 檢測(cè)方法并不是。建議考慮多因子檢測(cè)方法，如固相芯片(樣本數(shù)量一般 5 個(gè)以內(nèi)，檢測(cè)指標(biāo)可達(dá)上百個(gè))及 Luminex 液相芯片方法（檢測(cè)樣本多達(dá) 80 個(gè)，檢測(cè)指標(biāo)多達(dá) 50 個(gè)）或微流控 ELISA 檢測(cè)系統(tǒng) Ella。可節(jié)約樣本及時(shí)間成本，也可保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。
5.預(yù)算評(píng)估
預(yù)算往往是大家優(yōu)先考慮的，實(shí)際上，不能夠一味講究產(chǎn)品價(jià)格，更需要考慮性價(jià)比。生物學(xué)是極其嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)，一致性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是基金、文章等評(píng)審過(guò)程中的因素，即使低廉的價(jià)格，不能夠重現(xiàn)結(jié)果，也是資源的另一種浪費(fèi)。
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